Mts1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401774

概要

S100A4は、細胞骨格ダイナミクス、細胞運動、細胞間シグナル伝達の調節因子として機能する、Ca2+結合性のS100ファミリータンパク質Mts1をコードする。Mts1は、非筋ミオシンIIやアクチン再構築に関わる因子などの標的と相互作用し、接着のターンオーバー、遊走、細胞外マトリックス応答に影響を与える。線維芽細胞や免疫系細胞集団を含む複数の細胞型で発現しており、活性化したストローマプログラムのマーカーとして用いられることが多い。S100A4の発現異常は、炎症性リモデリングや腫瘍関連の浸潤・転移表現型と関連づけられており、組織線維化、免疫細胞トラフィッキング、がん細胞播種の研究において重要である。

Mts1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるS100A4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、S100A4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、S100A4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Mts1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Mts1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、S100A4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Mts1の機能に不可欠なS100A4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、S100A4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Mts1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMts1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、S100A4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Mts1 HDRプラスミド（h）および Mts1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはS100A4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のS100A4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。