MFSD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-429366

概要

Mfsd2aは、脂質の取り扱いと膜の恒常性に関与するメジャー・ファシリテーター・スーパーファミリー（MFS）トランスポーターであるMFSD2をコードしており、内皮生物学および神経組織の生理における役割がよく確立されています。血液脳関門（BBB）では、MFSD2がトランスサイトーシスの制御に寄与し、LPC結合型オメガ3脂肪酸などのリゾホスホリピドの送達にも影響を与えることで、神経血管ユニットの完全性や神経細胞機能に影響します。MFSD2A活性の変化は、バリア機能の破綻、神経発生上の表現型、ならびに内皮および代謝ストレスに関連した炎症シグナルの変化と関連づけられています。マウスモデルでは、Mfsd2aは、脂質輸送に連動したシグナル伝達、血管透過性の制御、組織特異的な代謝適応を研究するための扱いやすい切り口を提供します。

MFSD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMfsd2a遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Mfsd2a内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Mfsd2aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MFSD2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MFSD2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Mfsd2a欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MFSD2の機能に不可欠なMfsd2aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Mfsd2aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MFSD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMFSD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Mfsd2a遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MFSD2 HDRプラスミド（m）および MFSD2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMfsd2aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMfsd2a標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。