Lingo-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404453

概要

LINGO1は、中枢神経系（CNS）に豊富に発現する、ロイシンリッチリピートおよび免疫グロブリンドメインを含む膜貫通タンパク質Lingo-1をコードしており、神経細胞の成長や髄鞘化を制御する受容体複合体の構成要素として機能します。Lingo-1はNogo受容体シグナル伝達や関連経路と相互作用し、軸索ガイダンス、神経突起伸長、オリゴデンドロサイト分化、ならびに細胞骨格リモデリングを調節します。神経系におけるニューロン—グリア間コミュニケーションや抑制性シグナルへの作用を通じて、LINGO1は脱髄、軸索再生不全、神経変性に関連する過程の文脈で研究されています。さらに、実験モデルでは、LINGO1の発現やシグナル伝達の変化がシナプス可塑性や神経炎症応答に及ぼし得る影響についても検討されています。

Lingo-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLINGO1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LINGO1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LINGO1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Lingo-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Lingo-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LINGO1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Lingo-1の機能に不可欠なLINGO1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LINGO1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Lingo-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLingo-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LINGO1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Lingo-1 HDRプラスミド（h）および Lingo-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLINGO1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLINGO1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。