KDEL receptor 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426938

概要

Kdelr1 は、KDEL 受容体 1 をコードしています。KDEL 受容体 1 は 7 回膜貫通型のソーティング受容体であり、小胞体（ER）内腔に存在する可溶性タンパク質の C 末端にある KDEL 様回収モチーフを認識し、ゴルジ体から ER への逆行性輸送を仲介します。KDEL 受容体 1 は pH 依存的に ER とゴルジ体の間を循環することで、ER のプロテオスタシスを維持し、適切なフォールディング能力を支えるとともに、分泌経路の忠実性を保ちます。ER–ゴルジ輸送および ER 品質管理の破綻は、アンフォールドタンパク質応答（UPR）シグナル伝達や分泌の変化を引き起こし得ますが、これらの過程は実験系において、ストレス感受性や変性に関連する表現型に広く関与することが示されています。そのためマウスモデルでは、Kdelr1 の機能攪乱は、免疫系・神経系・代謝的に活発な組織にわたって、分泌経路の恒常性と細胞ストレス応答を解析する上で重要です。

KDEL receptor 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるKdelr1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Kdelr1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Kdelr1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KDEL receptor 1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KDEL receptor 1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Kdelr1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KDEL receptor 1の機能に不可欠なKdelr1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Kdelr1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KDEL receptor 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびKDEL receptor 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Kdelr1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KDEL receptor 1 HDRプラスミド（m）および KDEL receptor 1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKdelr1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKdelr1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。