KBTBD6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409349

Descripción general

KBTBD6 (kelch repeat and BTB domain containing 6) codifica una proteína de la familia BTB–BACK–Kelch que se predice que actúa como adaptador de sustratos dentro de complejos de ligasa E3 de ubiquitina basados en CUL3. Mediante la unión a cullina mediada por BTB y el reconocimiento de sustratos dependiente de Kelch, KBTBD6 está en posición de regular la ubiquitinación y el recambio proteasomal de proteínas que controlan la progresión del ciclo celular, la organización del citoesqueleto y la señalización sensible al estrés. Estos procesos de control de calidad proteica influyen en vías como la degradación dependiente de ubiquitina y en programas transcripcionales y proliferativos asociados. La desregulación de adaptadores de ligasas de ubiquitina se vincula con frecuencia a alteraciones de la proteostasis y de estados de señalización observados en el cáncer y otros trastornos, lo que hace que KBTBD6 sea relevante para estudios mecanísticos de la regulación mediada por ubiquitina.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KBTBD6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KBTBD6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KBTBD6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KBTBD6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KBTBD6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KBTBD6 para la investigación de la señalización de KBTBD6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KBTBD6 críticos para la función de KBTBD6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KBTBD6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KBTBD6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KBTBD6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KBTBD6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KBTBD6 (h) y el plásmido HDR KBTBD6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KBTBD6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KBTBD6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.