Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421160

Visão geral

Itga2b codifica a integrina αIIb (CD41), que se associa à integrina β3 (CD61) para formar o receptor plaquetário de fibrinogênio αIIbβ3, um mediador central da adesão e agregação plaquetárias. Após a ativação, a αIIbβ3 passa por sinalização “inside-out” e “outside-in”, que conecta ligantes da matriz extracelular, como o fibrinogênio e o fator de von Willebrand, ao remodelamento do citoesqueleto, à dinâmica de adesões focais e a vias de sinalização dependentes de Src/FAK. Em camundongos, a expressão de Itga2b marca o comprometimento com a linhagem megacariocítica e sustenta a produção de plaquetas e as respostas hemostáticas. A sinalização de integrinas desregulada e a ativação plaquetária alterada são amplamente relevantes para estudos de trombocitopenia, fenótipos hemorrágicos, trombose associada à inflamação e comunicação cruzada plaqueta–sistema imune em modelos de doença vascular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Itga2b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Itga2b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Itga2b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Integrin αIIb/ITGA2B/CD41.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Itga2b para a investigação da sinalização de Integrin αIIb/ITGA2B/CD41, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Itga2b críticos para a função Integrin αIIb/ITGA2B/CD41
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Itga2b para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Itga2b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Itga2b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Itga2b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.