IFN-αB CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421046

概要

マウスの Ifnab はインターフェロンαB（IFN-αB）をコードしており、これは自然免疫の抗ウイルス防御を増幅し、その後の獲得免疫応答の形成にも影響を与えるI型インターフェロンです。cGAS–STING、RIG-I/MDA5–MAVS、エンドソームTLRなどの経路を介したパターン認識受容体シグナルにより誘導されると、IFN-αBはIFNARに結合してJAK–STATシグナル伝達を活性化し、抗原提示、アポトーシス、炎症性サイトカインネットワークを調節するインターフェロン刺激遺伝子（ISG）の転写を促進します。I型インターフェロン活性の制御異常は慢性炎症や自己免疫に関与するとされ、ウイルス感染や免疫介在性病態のモデルでは、変化したインターフェロンシグネチャーがしばしば解析されます。そのためIfnabの機能は、宿主—病原体相互作用、骨髄系およびリンパ系細胞のプログラミング、ならびにインターフェロン駆動性の組織応答を研究する上で重要です。

IFN-αB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIfnab遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ifnab内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ifnabのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFN-αBタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IFN-αBシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ifnab欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IFN-αBの機能に不可欠なIfnabエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ifnabゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IFN-αB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIFN-αB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ifnab遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IFN-αB HDRプラスミド（m）および IFN-αB HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIfnabホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIfnab標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。