IFI-204 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421033

概要

マウス Ifi204 は、インターフェロン誘導性の PYHIN タンパク質ファミリーに属する IFI-204 をコードしており、自然免疫による監視や炎症関連遺伝子発現の制御に関与するとされています。IFI-204 は、核内および細胞質における核酸センサー系と関連し、これらのプログラムは I 型インターフェロンシグナル、NF-κB に連動した転写応答、ならびに細胞周期制御のチェックポイントへと収束します。これらの経路を通じて、Ifi204 は、抗ウイルス制限、マクロファージや樹状細胞の活性化、増殖状態と細胞老化状態の調節といった文脈で研究されてきました。したがって、IFI-204 活性の制御異常は、慢性炎症、自己免疫様表現型、感染に起因する病態、腫瘍—免疫相互作用の実験モデルにおいて重要となり得ますが、臨床的転帰を示唆するものではありません。

IFI-204 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIfi204遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ifi204内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ifi204のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFI-204タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IFI-204シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ifi204欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IFI-204の機能に不可欠なIfi204エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ifi204ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IFI-204 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIFI-204 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ifi204遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IFI-204 HDRプラスミド（m）および IFI-204 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIfi204ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIfi204標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。