IFI-203 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421032

概要

Ifi203は、マウスのインターフェロン誘導性タンパク質であるIFI-203をコードしており、自然免疫による監視機構や炎症関連遺伝子プログラムの制御に関与するとされています。IFI-203は一般に、インターフェロン刺激応答の文脈で研究されており、核酸センシング、転写制御、ならびに下流のサイトカインシグナル伝達に影響を及ぼし得ます。インターフェロン経路の制御異常は、自己免疫、慢性炎症、宿主―病原体相互作用のモデルと関連するため、Ifi203は細胞内在性の免疫回路を解析するうえで有用な遺伝子座です。Ifi203の機能喪失または機能獲得の攪乱により、インターフェロン駆動のプログラムがマウスにおける免疫細胞の活性化状態や組織の炎症表現型をどのように形成するかを明らかにする手がかりが得られます。

IFI-203 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIfi203遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ifi203内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ifi203のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFI-203タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IFI-203シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ifi203欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IFI-203の機能に不可欠なIfi203エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ifi203ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IFI-203 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIFI-203 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ifi203遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IFI-203 HDRプラスミド（m）および IFI-203 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIfi203ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIfi203標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。