HSPA8/HSC70 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-418508

개요

HSPA8(HSC70)은 HSP70 계열의 분자 샤페론으로, 지속적으로 발현되며 ATP 의존적인 폴딩/리폴딩과 신생 단백질 또는 스트레스로 손상된 단백질의 선별(triage)을 촉진해 단백질 항상성(proteostasis)을 유지하는 데 기여합니다. 또한 리소좀 LAMP2A를 통한 샤페론 매개 자가포식(CMA), 엔도사이토시스 및 클라트린 코트의 언코팅(uncoating), 스트레스 과립(stress granule) 역학 조절 등 단백질 품질 관리 경로에 관여하여 단백질 독성 및 대사 스트레스에 대한 세포 반응에 영향을 미칩니다. HSPA8은 보조 샤페론 및 유비퀴틴–프로테아좀 시스템과의 상호작용을 통해 다양한 세포 유형에서 단백질 턴오버, 소기관 항상성, 신호전달의 견고성 유지에도 관여합니다. HSPA8 관련 샤페론 네트워크의 조절 이상은 단백질 응집 관련 생물학과, 신경퇴행성 질환 및 암 연구 맥락에서 관찰되는 스트레스 적응 프로그램의 변화와 연관되어 보고되어 왔습니다.

HSPA8/HSC70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 HSPA8 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 HSPA8 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 HSPA8의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HSPA8/HSC70 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HSPA8/HSC70 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 HSPA8 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HSPA8/HSC70 기능에 중요한 HSPA8 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 HSPA8 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HSPA8/HSC70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HSPA8/HSC70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 HSPA8 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HSPA8/HSC70 HDR 플라스미드 (h) 및 HSPA8/HSC70 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 HSPA8 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 HSPA8 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.