HS6ST2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407513

概要

HS6ST2は、ヘパラン硫酸プロテオグリカンの生合成過程において、グルコサミン残基の6-O-硫酸化を触媒するゴルジ体局在酵素「ヘパラン硫酸6-O-スルホトランスフェラーゼ2」をコードします。この修飾は、リガンド結合や共受容体機能を制御するヘパラン硫酸の硫酸化パターンを形成し、FGF、VEGF、WNT、BMP、ケモカインによるシグナルなどの経路に影響を与えます。細胞外マトリックスおよび細胞表面のグリコサミノグリカン相互作用を調整することで、HS6ST2は細胞接着、遊走、発生パターン形成に寄与します。ヘパラン硫酸の硫酸化異常は、増殖因子シグナルの破綻や腫瘍微小環境のリモデリングと関連づけられており、細胞外マトリックス依存的なシグナルに関わるがん生物学やその他の疾患において、HS6ST2の研究が支持されています。

HS6ST2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるHS6ST2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HS6ST2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HS6ST2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HS6ST2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HS6ST2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HS6ST2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HS6ST2の機能に不可欠なHS6ST2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HS6ST2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HS6ST2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびHS6ST2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HS6ST2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HS6ST2 HDRプラスミド（h）および HS6ST2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHS6ST2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHS6ST2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。