GCNF CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406967

개요

NR6A1는 배아 발달과 생식세포 생물학에서 주로 전사 억제자로 기능하는 고아 핵 수용체인 생식세포 핵 인자(GCNF)를 암호화합니다. GCNF는 표적 프로모터의 반응 요소에 결합하고 염색질 상태를 변화시키는 코리프레서 복합체를 모집함으로써, 계통(lineage) 지정과 분화 프로그램의 유지에 기여합니다. 인간 세포에서 NR6A1이 조절하는 네트워크는 POU5F1/OCT4와 같은 유전자의 억제를 포함해 다능성 및 분화 조절 회로와 교차하며, 발달 전환의 후성유전학적 조절과의 연관성을 보여줍니다. NR6A1 활성의 이상 조절은 비정상적 분화와 전사 재프로그래밍이 관여하는 맥락에서 연구되어 왔으며, 발달 장애와 종양 세포 가소성 연구에 중요한 표적이 됩니다.

GCNF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NR6A1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NR6A1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NR6A1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GCNF 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GCNF 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NR6A1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GCNF 기능에 중요한 NR6A1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NR6A1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GCNF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GCNF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NR6A1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GCNF HDR 플라스미드 (h) 및 GCNF HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NR6A1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NR6A1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.