FAM72A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409422

Descripción general

FAM72A codifica una proteína restringida a vertebrados vinculada a programas asociados al ciclo celular y a estados proliferativos, con expresión enriquecida en células en división y en tejidos neurales en desarrollo. Aunque su mecanismo molecular aún se está definiendo, FAM72A se ha asociado con la regulación de la estabilidad del genoma y con procesos relacionados con el daño del ADN que se conectan con las respuestas al estrés de replicación. Estudios transcriptómicos y genómicos informan con frecuencia de una expresión alterada de FAM72A en múltiples tipos de tumores, en consonancia con un papel en la proliferación oncogénica y la plasticidad de linaje. Estas observaciones hacen de FAM72A un objetivo útil para investigar el control del ciclo celular, las dependencias de vías de reparación del ADN y biomarcadores de poblaciones celulares altamente proliferativas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FAM72A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FAM72A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FAM72A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FAM72A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FAM72A.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FAM72A para la investigación de la señalización de FAM72A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FAM72A críticos para la función de FAM72A
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FAM72A para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FAM72A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FAM72A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FAM72A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FAM72A (h) y el plásmido HDR FAM72A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FAM72A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FAM72A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.