eIF1B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403809

概要

EIF1B は真核生物翻訳開始因子 1B（eIF1B）をコードしており、40S リボソーム前開始複合体のダイナミクスを制御することを通じて、キャップ依存的翻訳開始の初期段階および開始コドン選択に関与する小型の開始因子であると考えられています。スキャニング過程や開始の忠実性に影響を与えることで、eIF1B はプロテオームの恒常性維持や、全体的なタンパク質合成を調節する成長シグナルおよびストレスに対する細胞応答に寄与します。翻訳開始因子ネットワークの攪乱は、細胞増殖プログラムの変化やストレス適応経路と結び付くことが多く、これらの過程はがん生物学や神経発生研究で一般的に検討されます。そのため EIF1B は、翻訳制御とヒト細胞における遺伝子発現プログラムの組み替え（リワイヤリング）を結び付ける機構研究において重要な対象となります。

eIF1B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるEIF1B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、EIF1B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、EIF1Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、eIF1Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、eIF1Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、EIF1B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• eIF1Bの機能に不可欠なEIF1Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、EIF1Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• eIF1B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびeIF1B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、EIF1B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  eIF1B HDRプラスミド（h）および eIF1B HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはEIF1Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のEIF1B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。