EHZF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432523
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EHZF O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico EHZF, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EHZF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432523 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Zfp521 codifica o fator de transcrição de dedo de zinco EHZF, um regulador nuclear implicado na coordenação do comprometimento de linhagem e de programas de expressão gênica do desenvolvimento em células de camundongo. O EHZF modula redes transcricionais envolvidas na manutenção e diferenciação de progenitores, com interações relatadas com vias que governam decisões de destino osteogênico, hematopoético e neural. Por meio de interações dependentes do contexto com cofatores associados à cromatina, o Zfp521 influencia o estado epigenético, a progressão do ciclo celular e a maturação de tipos celulares especializados. A atividade desregulada de Zfp521 tem sido associada na literatura a fenótipos alterados de diferenciação e proliferação, relevantes para a modelagem de anomalias do desenvolvimento e transformação oncogênica em sistemas experimentais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EHZF (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Zfp521 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Zfp521, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Zfp521 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EHZF.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Zfp521 para a investigação da sinalização de EHZF, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Zfp521 críticos para a função EHZF
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Zfp521 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo EHZF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo EHZF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Zfp521. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo EHZF Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR EHZF (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Zfp521 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Zfp521 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.