CSN8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-430844

概要

Cops8 は CSN8 をコードしており、CSN8 は COP9 シグナロソームの中核サブユニットとして、カリリンのネディル化状態を制御することでカリリン‐RING 型 E3 ユビキチンリガーゼを調節し、その結果としてユビキチン依存的なタンパク質分解回転に影響を与えます。この作用を通じて、CSN8 は主要な制御因子タンパク質の安定性を調整し、プロテオスタシス、細胞周期進行、DNA 損傷応答、ならびにストレス適応シグナル伝達に寄与します。COP9 シグナロソーム機能の破綻は、炎症シグナルの変化、発生および組織恒常性の障害、アポトーシス制御の破綻と関連づけられており、Cops8 はユビキチン制御と細胞の健全性（フィットネス）を結び付ける経路の機構解明研究において重要な対象となります。マウスモデルでは、CSN 構成要素の攪乱が成長制御や臓器機能の異常としばしば関連しており、治療効果を示唆することなく、疾患関連の細胞表現型を検討するための研究に利用できることを支持します。

CSN8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCops8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cops8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cops8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CSN8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CSN8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cops8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CSN8の機能に不可欠なCops8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cops8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CSN8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCSN8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cops8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CSN8 HDRプラスミド（m）および CSN8 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCops8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCops8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。