Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CSN8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409800
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CSN8 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CSN8, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CSN8 Anticorpo (F-8): sc-393482
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CSN8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409800 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
COPS8 codifica a CSN8, uma subunidade central do signalossoma COP9 que regula a homeostase proteica ao catalisar a desneddilação de ligases de ubiquitina do tipo cullin-RING. Por meio dessa atividade, a CSN8 ajusta a degradação dependente de ubiquitina de reguladores-chave do ciclo celular, fatores de transcrição e proteínas de resposta ao estresse, influenciando processos como a sinalização de dano ao DNA, o equilíbrio entre autofagia e proteassoma e a apoptose. A função da CSN8 está integrada a vias mais amplas de ubiquitina–proteassoma e de neddilação que controlam a transdução de sinais e programas de desenvolvimento. A desregulação de componentes do signalossoma COP9, incluindo a CSN8, tem sido associada a alterações na sinalização proliferativa e na adaptação ao estresse celular, relevantes para a biologia do câncer e para fenótipos neurodegenerativos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CSN8 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene COPS8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do COPS8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do COPS8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CSN8.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de COPS8 para a investigação da sinalização de CSN8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) COPS8 críticos para a função CSN8
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos COPS8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CSN8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CSN8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus COPS8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CSN8 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CSN8 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia COPS8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo COPS8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.