CPSF2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407012

개요

CPSF2(절단 및 폴리아데닐화 특이성 인자 서브유닛 2)는 포유류 mRNA 3′ 말단 처리 기계의 핵심 구성요소로, 폴리아데닐화 신호의 인식과 절단·폴리아데닐화 복합체의 조립에 기여한다. CPSF2는 pre-mRNA 절단과 poly(A) 꼬리 첨가에 관여함으로써 전사체 성숙, mRNA 안정성, 번역 효율에 영향을 미치며, 그 결과 전반적인 유전자 발현 프로그램을 형성한다. CPSF2 의존적 3′ 말단 처리 과정은 전사 종결 및 대체 폴리아데닐화와도 연결되는데, 이러한 과정들은 증식과 분화 동안 전사체 구성을 재편한다. 3′ 말단 형성과 폴리아데닐화 부위 선택의 이상 조절은 질병과 연관된 발현 상태에서 흔히 관찰되므로, CPSF2는 RNA 처리 표현형과 그에 따른 하위 세포 효과를 연구하는 데 유용한 핵심 지점이다.

CPSF2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CPSF2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CPSF2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CPSF2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CPSF2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CPSF2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CPSF2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CPSF2 기능에 중요한 CPSF2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CPSF2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CPSF2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CPSF2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CPSF2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CPSF2 HDR 플라스미드 (h) 및 CPSF2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CPSF2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CPSF2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.