Contactin 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406301

Visão geral

CNTN2 codifica a contactina 2 (TAG-1), uma molécula de adesão celular da superfamília das imunoglobulinas, ancorada por glicosilfosfatidilinositol (GPI) e enriquecida no sistema nervoso. A contactina 2 auxilia a orientação axonal, o crescimento de neuritos e a estabilização das interações neurônio–glia ao organizar complexos de reconhecimento na superfície celular e influenciar a remodelação do citoesqueleto durante a formação de circuitos neurais. Ela contribui para a montagem e a manutenção de domínios especializados de membrana, como os segmentos iniciais do axônio e os justaparanódios, por meio de interações com a matriz extracelular e parceiros de adesão. Alterações na expressão ou na função de CNTN2 têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, tornando-o relevante para estudos de conectividade sináptica e excitabilidade neuronal.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Contactin 2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CNTN2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CNTN2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CNTN2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Contactin 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CNTN2 para a investigação da sinalização de Contactin 2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CNTN2 críticos para a função Contactin 2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CNTN2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Contactin 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Contactin 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CNTN2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Contactin 2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Contactin 2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CNTN2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CNTN2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.