Contactin 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406301

概要

CNTN2は、神経系に豊富に発現するグリコシルホスファチジルイノシトール（GPI）アンカー型の免疫グロブリンスーパーファミリー細胞接着分子であるコンタクチン2（TAG-1）をコードします。コンタクチン2は、細胞表面の認識複合体を組織化し、神経回路形成の過程で細胞骨格のリモデリングに影響を与えることで、軸索誘導、神経突起伸長、ならびにニューロン―グリア間相互作用の安定化を支えます。また、細胞外マトリックスや接着パートナーとの相互作用を介して、軸索起始部（AIS）や傍絞輪部（juxtaparanode）などの特殊な膜ドメインの形成および維持にも寄与します。CNTN2の発現や機能の変化は、神経発達および神経精神疾患に関連する表現型と関連づけられており、シナプス結合性や神経細胞の興奮性を研究する上で重要な標的です。

Contactin 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCNTN2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CNTN2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CNTN2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Contactin 2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Contactin 2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CNTN2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Contactin 2の機能に不可欠なCNTN2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CNTN2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Contactin 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびContactin 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CNTN2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Contactin 2 HDRプラスミド（h）および Contactin 2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCNTN2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCNTN2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。