connexin 37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420559

概要

マウスGja4はコネキシン37（Cx37）をコードしており、Cx37はギャップ結合タンパク質として細胞間チャネルを形成し、イオンや小分子代謝産物を直接やり取りすることで組織の恒常性を協調的に維持します。Cx37は接触依存的なシグナル伝達に寄与し、内皮細胞および平滑筋細胞の挙動を規定するとともに、血管発生、バリア機能の制御、メカノトランスダクションに関与します。ギャップ結合を介した細胞間コミュニケーションを通じて、細胞周期制御、遊走、炎症性シグナル伝達などの過程に影響を与えます。コネキシン37の機能変化は血管機能障害や心血管系に関連する表現型と関連づけられており、血管新生、血栓関連経路、免疫—血管クロストークのモデルにおける利用を支持します。

connexin 37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるGja4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Gja4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Gja4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、connexin 37タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、connexin 37シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Gja4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• connexin 37の機能に不可欠なGja4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Gja4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• connexin 37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびconnexin 37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Gja4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  connexin 37 HDRプラスミド（m）および connexin 37 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGja4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGja4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。