Cerebellin 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407032

概要

CBLN1は、中央神経系に豊富に存在する分泌性糖タンパク質であるセレベリン1をコードしており、興奮性シナプスの形成と維持を支えるシナプスオーガナイザーとして機能します。セレベリン1は、シナプス前・シナプス後の特殊化を連結するシナプス間（トランスシナプス）接着複合体に関与し、小脳および関連回路におけるシナプス結合性や神経伝達を形成します。これらの相互作用を通じて、神経発生、シナプス可塑性、回路の精緻化といった、運動協調や学習に重要な過程に影響を及ぼします。CBLN1の発現変化や、セレベリン介在のシナプス組織化の破綻は、神経発達および精神神経疾患様の表現型と関連づけられており、シナプス病（synaptopathy）の機序研究において重要です。

Cerebellin 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCBLN1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CBLN1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CBLN1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Cerebellin 1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Cerebellin 1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CBLN1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Cerebellin 1の機能に不可欠なCBLN1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CBLN1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Cerebellin 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCerebellin 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CBLN1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Cerebellin 1 HDRプラスミド（h）および Cerebellin 1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCBLN1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCBLN1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。