CEACAM7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406726

概要

CEACAM7（carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 7：癌胎児性抗原関連細胞接着分子7）は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属するGPIアンカー型タンパク質で、上皮表面における同種（ホモフィリック）および異種（ヘテロフィリック）の細胞間接着に関与するとされています。膜構造の形成や接触依存的シグナル伝達に影響する相互作用を介して、CEACAM7は粘膜組織における上皮の分化、極性、ならびにバリア関連のプロセスに寄与します。CEACAM7の発現変動は、上皮のリモデリングや、腫瘍に伴う接着・分化プログラムの変化と関連づけられており、細胞接着と増殖制御を結びつける機構を研究するうえで有用な分子ノードとなります。がん生物学および粘膜上皮研究では、経路の代償や接着駆動性の表現型を理解する目的で、CEACAM7は関連するCEACAMファミリー分子と併せて解析されることが多いです。

CEACAM7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCEACAM7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CEACAM7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CEACAM7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CEACAM7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CEACAM7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CEACAM7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CEACAM7の機能に不可欠なCEACAM7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CEACAM7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CEACAM7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCEACAM7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CEACAM7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CEACAM7 HDRプラスミド（h）および CEACAM7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCEACAM7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCEACAM7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。