CD96 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407300
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD96 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD96, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD96 Anticorpo (NK92.50.1): sc-53574
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD96 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407300 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CD96 é um recetor transmembranar do tipo I da superfamília das imunoglobulinas, expresso principalmente em células T e células NK, onde modula a formação da sinapse imunitária e a função efetora citotóxica. Participa em adesão e em sinalização co-inibitória por meio de interações na rede nectina/nectina-like, influenciando vias de sinalização que ajustam os limiares de ativação e a produção de citocinas. A função de CD96 cruza-se com a regulação de checkpoints imunitários, juntamente com recetores como TIGIT e CD226, moldando respostas a células sob stress ou transformadas no microambiente tumoral. A atividade e a expressão desreguladas de CD96 têm sido associadas a alterações na imunidade antitumoral, inflamação crónica e mecanismos de evasão imunitária relevantes para a investigação em oncologia e imunologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD96 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CD96 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CD96, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CD96 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD96.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CD96 para a investigação da sinalização de CD96, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CD96 críticos para a função CD96
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CD96 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD96 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CD96 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CD96. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD96 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CD96 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CD96 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CD96 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.