CD164 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-424720

Panoramica

Cd164 codifica CD164, una glicoproteina sialomucinica di superficie cellulare che favorisce l’adesione cellulare e regola il traffico delle cellule ematopoietiche e di altri progenitori all’interno dei microambienti tissutali. CD164 partecipa al trasporto endosomiale e all’organizzazione dei recettori sulla membrana plasmatica, influenzando la segnalazione e il comportamento migratorio in vie legate alle interazioni con la nicchia delle cellule staminali. Nei modelli murini, le alterazioni dell’espressione o della funzione di Cd164 vengono studiate nel contesto dell’ematopoiesi, dello sviluppo delle cellule immunitarie e del rimodellamento tissutale. Una deregolazione di CD164 è stata associata a cambiamenti nella proliferazione, nell’invasione e nel crosstalk con il microambiente, rilevanti per la biologia del cancro e per i meccanismi delle malattie infiammatorie.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CD164 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cd164 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cd164 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cd164 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CD164.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cd164 per lo studio della segnalazione di CD164, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Cd164 critici per la funzione di CD164
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cd164 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CD164 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal CD164 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cd164. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CD164 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR CD164 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cd164 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cd164 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.