Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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C1QBP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419387
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- C1QBP Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico C1QBP, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: C1QBP Antibody (74.5.2): sc-23885
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
C1QBP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-419387 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
C1qbp codifica C1QBP (noto anche come gC1qR/p32), una proteina multifunzionale arricchita nei mitocondri che supporta la fosforilazione ossidativa, la funzione del ribosoma mitocondriale e il metabolismo energetico cellulare. Partecipa inoltre al processamento dell’RNA e regola l’apoptosi e la segnalazione dell’immunità innata attraverso interazioni con vie correlate al complemento e ai recettori di riconoscimento dei pattern. Nei sistemi murini, un’attività alterata di C1QBP è stata collegata a risposte allo stress mitocondriale, a cambiamenti nella segnalazione infiammatoria e a una suscettibilità a fenotipi rilevanti per disturbi metabolici e neurodegenerativi. Queste funzioni rendono C1QBP un nodo utile per analizzare il crosstalk tra mitocondri e immunità e la regolazione bioenergetica nei modelli di malattia.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO C1QBP (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene C1qbp in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del C1qbp insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto C1qbp a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina C1QBP.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di C1qbp per lo studio della segnalazione di C1QBP, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni C1qbp critici per la funzione di C1QBP
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di C1qbp per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal C1QBP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal C1QBP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus C1qbp. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal C1QBP Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR C1QBP (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia C1qbp per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio C1qbp definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.