BTN2A2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433634

Descripción general

Btn2a2 codifica la butirofilina de la subfamilia 2, miembro A2 (BTN2A2), una proteína transmembrana de la superfamilia de las inmunoglobulinas que actúa como regulador coinhibidor de las respuestas de los linfocitos T. En ratones, la expresión de BTN2A2 en células presentadoras de antígeno modula los umbrales de activación de los linfocitos T, favoreciendo la tolerancia periférica al limitar la proliferación y la producción de citocinas. Esta actividad tipo “checkpoint” sitúa a BTN2A2 dentro de las vías que gobiernan la señalización de la sinapsis inmunitaria, la coestimulación y el mantenimiento de la homeostasis inmunitaria. La señalización desregulada de BTN2A2 se ha vinculado, en modelos experimentales, con respuestas inflamatorias alteradas relevantes para la autoinmunidad, las infecciones y las interacciones tumor-inmunidad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO BTN2A2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Btn2a2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Btn2a2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Btn2a2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BTN2A2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Btn2a2 para la investigación de la señalización de BTN2A2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Btn2a2 críticos para la función de BTN2A2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Btn2a2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido BTN2A2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido BTN2A2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Btn2a2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BTN2A2 (m) y el plásmido HDR BTN2A2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Btn2a2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Btn2a2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.