Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
BLM hydrolase Antibody (F-9): sc-166777. Near-infrared western blot analysis of BLM hydrolase expression in CCRF-CEM (A), HL-60 (B), MOLT-4 (C) and K-562 (D) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180.
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BLM hydrolase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-404411
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- BLM hydrolase CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在BLM hydrolase基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：BLM hydrolase: sc-166777，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
BLM hydrolase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-404411 | 20 µg | $397.00 |
概述
人类 **BLMH** 基因编码博来霉素水解酶（bleomycin hydrolase），这是一种位于胞质的半胱氨酸氨肽酶，参与细胞内肽段的蛋白水解加工以及蛋白质质量控制的维持。BLMH 参与氨基酸回收，并可通过影响肽段周转与蛋白稳态（proteostasis）网络，与细胞应激反应相关联。BLMH 活性异常已在药物代谢和对博来霉素诱导细胞毒性的易感性等背景下得到研究；此外，在肽段清除通路受扰的情况下，它也被用于探索与神经退行性改变及炎症表型的潜在联系。作为一种广泛表达的酶，BLMH 为研究“依赖肽酶的稳态调控”如何与氧化应激及损伤应答信号通路发生交叉提供了一个有价值的切入点。
BLM hydrolase CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中BLMH基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对BLMH基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏BLMH开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使BLM hydrolase蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建BLMH缺失的细胞模型，用于BLM hydrolase信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 BLM hydrolase 功能至关重要的 BLMH 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 BLMH 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 BLM hydrolase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 BLM hydrolase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 BLMH 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 BLM hydrolase HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 BLM hydrolase HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由BLMH同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定BLMH靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。