Bex1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422657

概要

BEX1（brain expressed X-linked 1）は、神経組織に豊富に発現する小型の細胞内タンパク質をコードしており、神経細胞の分化、軸索誘導、細胞周期制御に関与すると考えられています。BEX1は神経栄養因子／NGF応答に関連するシグナル伝達ネットワークに関与し、生存やストレス応答経路に影響する制御タンパク質と相互作用することで、転写プログラムを調節し得ます。発生期および成体の神経系では、BEX1発現の変化が神経突起伸長や神経細胞の維持の変化と関連して報告されており、神経発達および神経変性研究における重要性が示唆されています。BEX1の発現異常は複数のがん関連発現データセットでも報告されており、腫瘍生物学モデルにおいて増殖やアポトーシスの表現型と関連づけられています。

Bex1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるBex1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Bex1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Bex1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Bex1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Bex1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Bex1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Bex1の機能に不可欠なBex1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Bex1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Bex1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびBex1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Bex1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Bex1 HDRプラスミド（m）および Bex1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBex1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBex1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。