BCAS2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405943

Übersicht

BCAS2 (breast carcinoma amplified sequence 2) kodiert ein konserviertes nukleäres Protein, das als Kernbestandteil des Prp19-assoziierten Spleißosomenkomplexes fungiert und das prä‑mRNA-Spleißen sowie die Genauigkeit der Spleißstellenwahl unterstützt. Über seine Funktionen in der RNA-Prozessierung und Genomstabilität beeinflusst BCAS2 den Zellzyklusverlauf, Transkriptionsprogramme und zelluläre Stressantworten. Eine veränderte BCAS2-Expression und eine Dysregulation des Spleißens wurden in mehreren Tumorkontexten mit onkogenen Phänotypen in Verbindung gebracht, was diesen Faktor mit Signalwegen verknüpft, die Proliferation und DNA-Schadenssignale steuern. Als Regulator der RNA-Reifung ist BCAS2 zudem relevant für die Untersuchung spleißosomenabhängiger Verwundbarkeiten und umfassender transkriptomischer Umprogrammierungen in menschlichen Zellen.

Das BCAS2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des BCAS2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des BCAS2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von BCAS2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die BCAS2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von BCAS2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der BCAS2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf BCAS2-Exone abzielen, die für die BCAS2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere BCAS2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom BCAS2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom BCAS2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des BCAS2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das BCAS2 HDR-Plasmid (h) und BCAS2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von BCAS2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten BCAS2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.