Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
BANP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412401
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BANP El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BANP, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BANP Anticuerpo (1524CT337.6.32): sc-517314
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BANP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-412401 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BANP (proteína nuclear asociada a BTG3), también conocida como SMAR1, es un factor nuclear de unión al ADN implicado en la organización de la cromatina y en el control transcripcional en regiones de anclaje a la matriz. Se ha relacionado con la regulación de la progresión del ciclo celular, las respuestas de los puntos de control y el mantenimiento de la estabilidad del genoma mediante la coordinación de programas transcripcionales y procesos asociados al daño en el ADN. La actividad de BANP se interseca con la remodelación de la cromatina y con redes de señalización asociadas a supresores tumorales, influyendo en la proliferación y en la expresión génica inducida por estrés. La desregulación de la expresión o la función de BANP se ha asociado con alteraciones del control del crecimiento y con fenotipos de integridad genómica relevantes para la biología del cáncer y modelos celulares relacionados.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BANP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BANP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BANP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BANP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BANP.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BANP para la investigación de la señalización de BANP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BANP críticos para la función de BANP
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BANP para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BANP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BANP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BANP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BANP (h) y el plásmido HDR BANP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BANP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BANP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.