Aquaporin 9/AQP9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401298

概要

AQP9はアクアポリン9をコードしており、細胞膜に存在するアクアグリセロポリン型チャネルとして、水およびグリセロール、尿素、その他の中性代謝物などの小分子溶質の双方向輸送を促進します。AQP9はグリセロールのフラックスを調節することで細胞のエネルギーバランスや脂質代謝に影響を与え、糖新生や浸透圧恒常性の維持など、代謝活性の高い組織におけるプロセスを支えます。免疫系および上皮の文脈では、AQP9活性の変化が炎症細胞機能やバリア生理の変化と関連づけられており、その発現は膜輸送と代謝・ストレス応答を結びつける経路と関連すると考えられています。AQP9発現の異常は、代謝性疾患やがん関連表現型など複数の疾患関連状況で報告されており、溶質輸送が増殖や生存プログラムに影響を及ぼし得ることが示唆されています。

Aquaporin 9/AQP9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるAQP9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、AQP9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、AQP9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Aquaporin 9/AQP9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Aquaporin 9/AQP9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、AQP9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Aquaporin 9/AQP9の機能に不可欠なAQP9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、AQP9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Aquaporin 9/AQP9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびAquaporin 9/AQP9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、AQP9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Aquaporin 9/AQP9 HDRプラスミド（h）および Aquaporin 9/AQP9 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAQP9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAQP9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。