Aquaporin 5/AQP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400567

Visão geral

AQP5 codifica a aquaporina 5, um canal de água de membrana que facilita o transporte rápido e seletivo de água através da membrana plasmática em tecidos epiteliais. Nos epitélios secretores das vias aéreas, das glândulas salivares e lacrimais e dos alvéolos pulmonares, a AQP5 sustenta a homeostase de fluidos e contribui para a hidratação da mucosa e a fisiologia de barreira ao regular o movimento transepitelial de água. Sua atividade integra-se às respostas ao estresse osmótico, ao transporte iônico epitelial e à organização das junções celulares, que em conjunto moldam o líquido da superfície das vias aéreas e a secreção glandular. A expressão ou a localização desregulada de AQP5 tem sido associada à disfunção epitelial em condições inflamatórias das vias aéreas, à hipofunção das glândulas salivares e a alterações no manejo de água na fisiopatologia pulmonar, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de secreção e remodelamento epitelial.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 5/AQP5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AQP5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AQP5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AQP5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aquaporin 5/AQP5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AQP5 para a investigação da sinalização de Aquaporin 5/AQP5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AQP5 críticos para a função Aquaporin 5/AQP5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AQP5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Aquaporin 5/AQP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Aquaporin 5/AQP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AQP5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Aquaporin 5/AQP5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Aquaporin 5/AQP5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AQP5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AQP5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.