非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
4E-BP1 抗体 (P-1) HRP: sc-9977 HRP. NIH/3T3 (A) 和 KNRK (B) 全细胞裂解液中 4E-BP1 表达的直接 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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4E-BP1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-420149
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- 4E-BP1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在4E-BP1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：4E-BP1: sc-9977，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
4E-BP1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-420149 | 20 µg | $397.00 |
概述
小鼠 Eif4ebp1 编码 4E-BP1，这是一种帽依赖性翻译抑制因子，可与 EIF4E 结合并限制 eIF4F 复合体的组装，从而根据营养与生长因子信号对 mRNA 翻译起始进行精细调控。4E-BP1 是 PI3K–AKT–mTORC1 轴的关键下游效应分子；被 mTORC1 磷酸化后，可解除对 EIF4E 的隔离并促进与细胞生长、代谢及应激适应相关转录本的选择性翻译。通过这一翻译检查点，Eif4ebp1 参与调控自噬、细胞周期进程以及蛋白质稳态相关程序。4E-BP1 信号失调常被用作分子层面的读出指标，用于评估癌症生物学、代谢紊乱以及神经发育与神经退行性过程模型中 mTOR 通路的异常活性。
4E-BP1 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Eif4ebp1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Eif4ebp1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Eif4ebp1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使4E-BP1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Eif4ebp1缺失的细胞模型，用于4E-BP1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 4E-BP1 功能至关重要的 Eif4ebp1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Eif4ebp1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 4E-BP1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 4E-BP1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Eif4ebp1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 4E-BP1 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 4E-BP1 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Eif4ebp1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Eif4ebp1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。