α-parvin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405769
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α-parvin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico α-parvin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α-parvin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405769 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PARVA codifica a α-parvina, um adaptador de adesão focal que se liga à actina e se associa à quinase ligada à integrina (ILK) e à PINCH para formar o complexo IPP, conectando as integrinas ao citoesqueleto de actina. Por meio de interações com a paxilina e outros componentes de adesão, a α-parvina contribui para a montagem de adesões focais, a remodelação do citoesqueleto e a mecanotransdução durante o espraiamento e a migração celular. A sinalização dependente de PARVA faz interface com vias de integrina/FAK e com a dinâmica de actina regulada por pequenas GTPases, sustentando a sobrevivência dependente de adesão e a polaridade celular. A desregulação desses processos é relevante para estudos de invasão de células tumorais, remodelação tecidual relacionada à fibrose e biologia cardiovascular e de músculo liso, em que alterações na adesão e na sinalização contrátil estão implicadas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO α-parvin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PARVA em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PARVA, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PARVA na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína α-parvin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PARVA para a investigação da sinalização de α-parvin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PARVA críticos para a função α-parvin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PARVA para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo α-parvin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo α-parvin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PARVA. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo α-parvin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR α-parvin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PARVA para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PARVA definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.