OSR1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-406034-LAC

Humanes OSR1 (odd-skipped related transcription factor 1) kodiert einen Zinkfinger‑DNA‑bindenden Transkriptionsfaktor, der entwicklungsbezogene Genprogramme reguliert, welche die mesenchymale Differenzierung, die Organogenese und die Gewebemusterbildung steuern. Die OSR1‑Aktivität beeinflusst Transkriptionsnetzwerke, die an der Festlegung des Zellschicksals und an epithelial‑mesenchymalen Interaktionen beteiligt sind, mit nachgeschalteten Effekten auf die Organisation der extrazellulären Matrix und auf Morphogen‑Signalwege. Eine veränderte OSR1‑Expression wurde mit dysregulierten Differenzierungszuständen in Verbindung gebracht und in Kontexten wie angeborenen urogenitalen und kraniofazialen Fehlbildungen sowie der krebsassoziierten transkriptionellen Reprogrammierung untersucht. Diese Eigenschaften machen OSR1 zu einem nützlichen Knotenpunkt, um Schaltkreise der Linienkontrolle und kontextabhängige Transkriptionsfaktor‑Funktionen in humanen Zellmodellen zu untersuchen.

OSR1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente OSR1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

OSR1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der OSR1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen OSR1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen OSR1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.