Plasmide Double Nickase (m) GDF-15: sc-423881-NIC

Le gène murin **Gdf15** code le facteur de différenciation et de croissance 15 (**GDF‑15**), une cytokine sensible au stress appartenant à la superfamille du **TGF‑β**, induite par les lésions cellulaires, le dysfonctionnement mitochondrial et des signaux inflammatoires. GDF‑15 peut transmettre des signaux via des voies associées aux **SMAD** et moduler, selon le contexte, l’activité des cellules immunitaires, l’homéostasie métabolique et le remodelage tissulaire. Des altérations de l’expression de GDF‑15 ont été associées à des phénotypes de stress cardiométabolique, à l’inflammation liée au cancer et à des processus neurodégénératifs, ce qui en fait un marqueur moléculaire utile de l’intégration des signaux de stress et d’inflammation. Dans les modèles expérimentaux, GDF‑15 est souvent étudié comme médiateur des réponses systémiques au stress et comme nœud reliant les voies inflammatoires à l’équilibre énergétique et aux programmes de survie cellulaire.

GDF-15 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Gdf15 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Gdf15. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Gdf15. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Gdf15.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.