Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
ErbB4/HER4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400275
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ErbB4/HER4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ErbB4/HER4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ErbB4/HER4 Anticorpo (C-7): sc-8050
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ErbB4/HER4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400275 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ERBB4 codifica o receptor tirosina-quinase ErbB4/HER4, um membro da família EGFR/ErbB que medeia a sinalização a jusante de neuregulinas e outros ligantes. Após a dimerização induzida por ligante e a autofosforilação, o ErbB4 ativa as vias MAPK/ERK, PI3K–AKT, JAK/STAT e PLCγ para regular decisões de destino celular, incluindo proliferação, diferenciação, migração e sobrevivência. A atividade de ERBB4 também está relacionada à endocitose do receptor e ao processamento proteolítico, que podem modular as saídas de sinalização nuclear em contextos celulares específicos. A desregulação da sinalização de ERBB4 e alterações na sua expressão ou no uso de isoformas têm sido associadas a redes de sinalização oncogênica e a fenótipos relevantes para doenças na biologia epitelial, neural e cardíaca.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ErbB4/HER4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ERBB4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ERBB4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ERBB4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ErbB4/HER4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ERBB4 para a investigação da sinalização de ErbB4/HER4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ERBB4 críticos para a função ErbB4/HER4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ERBB4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ErbB4/HER4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ErbB4/HER4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ERBB4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ErbB4/HER4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ErbB4/HER4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ERBB4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ERBB4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.