CPOX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405130
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CPOX O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CPOX, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CPOX Anticorpo (B-9): sc-393388
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CPOX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405130 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A coproporfirinogénio oxidase (CPOX) é uma enzima mitocondrial que catalisa a descarboxilação oxidativa do coproporfirinogénio III em protoporfirinogénio IX, uma etapa tardia fundamental na via de biossíntese do heme. Ao controlar o fluxo através do metabolismo das porfirinas, a CPOX sustenta processos dependentes de heme, incluindo a respiração mitocondrial, a função dos citocromos e a homeostase redox celular. A disrupção da atividade da CPOX está associada à acumulação de intermediários porfirínicos e tem sido relacionada com a coproporfiria hereditária e fenótipos metabólicos afins. Assim, a CPOX constitui um ponto mecanisticamente informativo para estudar o metabolismo mitocondrial, as respostas ao stress oxidativo e a regulação da via heme/porfirinas em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CPOX (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CPOX em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CPOX, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CPOX na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CPOX.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CPOX para a investigação da sinalização de CPOX, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CPOX críticos para a função CPOX
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CPOX para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CPOX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CPOX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CPOX. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CPOX Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CPOX (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CPOX para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CPOX definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.