AMPKβ2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403537-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AMPKβ2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AMPKβ2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AMPKβ2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PRKAB2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AMPKβ2 Anticorpo (C-7): sc-376752
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AMPKβ2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403537-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AMPKβ2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403537-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRKAB2 codifica a subunidade regulatória β2 da proteína quinase ativada por AMP (AMPK), um sensor central de energia que coordena as respostas celulares à disponibilidade de nutrientes e ao estresse energético. A AMPKβ2 ajuda a estruturar as subunidades α catalítica e γ regulatória e contribui para a estabilidade do complexo, a localização subcelular e a seleção de substratos, influenciando assim vias que regulam a captação de glicose, a oxidação de ácidos graxos, a autofagia e a inibição da sinalização anabólica via mTORC1. Por meio dessas funções, a AMPKβ2 participa da manutenção da homeostase metabólica entre tecidos e molda programas adaptativos durante hipóxia, estresse mitocondrial e sinalização semelhante à do exercício. A desregulação da sinalização de AMPK, incluindo alterações na atividade associada a PRKAB2, tem sido ligada a fenótipos de doenças metabólicas e é frequentemente estudada no contexto do metabolismo de células cancerosas e da tolerância ao estresse.
AMPKβ2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PRKAB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PRKAB2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PRKAB2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PRKAB2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.