Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Paraplegin Antibody (C-5): sc-514393. Western blot analysis of Paraplegin expression in HeLa (A), Hep G2 (B) and JAR (C) whole cell lysates.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Paraplegin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406299
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Paraplegin CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Paraplegin基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Paraplegin: sc-514393，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Paraplegin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-406299 | 20 µg | $397.00 |
概述
SPG7 编码 paraplegin（副截瘫蛋白），这是一种位于线粒体内膜的 ATP 依赖性金属蛋白酶，属于 m-AAA 蛋白酶复合体，负责蛋白质质量控制、蛋白水解加工，以及对错误折叠的膜蛋白和基质相关底物的降解更新。Paraplegin 通过对内膜蛋白组成的协同监测，参与维持线粒体蛋白稳态、呼吸链功能，并在氧化应激与蛋白毒性应激下介导稳态应答。SPG7 功能受损会扰乱线粒体功能，并与包括遗传性痉挛性截瘫在内的神经退行性表型相关，因此是研究轴突易损性与依赖能量的神经元维持机制的有用靶点。以 SPG7 为核心的模型也有助于阐明线粒体动力学、未折叠蛋白反应以及应激适应性信号通路等相关路径。
Paraplegin CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中SPG7基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对SPG7基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏SPG7开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Paraplegin蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建SPG7缺失的细胞模型，用于Paraplegin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Paraplegin 功能至关重要的 SPG7 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 SPG7 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Paraplegin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Paraplegin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 SPG7 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Paraplegin HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Paraplegin HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由SPG7同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定SPG7靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。