Plasmide Double Nickase (m) HSF1: sc-420971-NIC

Le facteur de choc thermique 1 (HSF1), codé par le gène murin *Hsf1*, est un régulateur transcriptionnel majeur de la réponse au choc thermique, qui maintient la protéostasie en situation de stress thermique et protéotoxique. Lorsqu’il est activé, HSF1 se trimérise et se lie aux éléments de réponse au choc thermique afin d’induire des chaperonnes moléculaires telles que HSP70 et HSP90, coordonnant le repliement des protéines, le contrôle qualité et la récupération après des dommages cellulaires. HSF1 s’intègre à des voies contrôlant l’homéostasie protéique, l’autophagie, l’apoptose et l’adaptation métabolique, modulant la survie cellulaire en conditions de stress. Une activité dérégulée de HSF1 a été associée à des processus pertinents pour la neurodégénérescence, le vieillissement, l’inflammation et des programmes de stress liés au cancer, ce qui en fait un nœud clé pour des études mécanistiques dans des modèles murins.

HSF1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Hsf1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Hsf1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Hsf1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Hsf1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.