Plasmide Double Nickase (h) FREM2: sc-408000-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FREM2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FREM2 Double Nickase (h) et le plasmide FREM2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FREM2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FREM2 Antibody (F-1): sc-376555
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FREM2 | sc-408000-NIC | 20 µg | $410.00 |
FREM2 code la protéine 2 de la matrice extracellulaire apparentée à FRAS1, une grande protéine associée à la membrane basale qui contribue à organiser l’adhérence épithélio-mésenchymateuse et à stabiliser la matrice extracellulaire au cours du développement. FREM2 participe au complexe FRAS/FREM au niveau de la membrane basale épidermique, soutenant la morphogenèse tissulaire et l’intégrité de la barrière via la régulation des interactions cellule–matrice. L’altération de FREM2 a été associée à des syndromes de malformations congénitales, ce qui reflète son rôle dans le développement cranio-facial, rénal et des membres. Dans des modèles cellulaires, la perturbation de FREM2 peut modifier l’assemblage de la membrane basale, la polarité épithéliale et des programmes de signalisation dépendants de l’adhérence.
FREM2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FREM2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FREM2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FREM2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FREM2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.