Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO FAAH (h): sc-402470
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- FAAH Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique FAAH, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FAAH Antibody (27-Y): sc-100739
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO FAAH (h) | sc-402470 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
La FAAH (fatty acid amide hydrolase) est une hydrolase à sérine associée à la membrane qui met fin à la signalisation en hydrolysant des amides d’acides gras bioactifs, notamment l’endocannabinoïde anandamide et des N‑acyléthanolamines apparentées. En contrôlant le renouvellement des médiateurs lipidiques, la FAAH module le tonus endocannabinoïde, s’articule avec la signalisation des récepteurs CB1/CB2 et influence des voies en aval dépendantes de l’AMPc/PKA, des MAPK et du calcium. L’activité de la FAAH façonne également des réseaux plus larges du métabolisme lipidique qui régissent les réponses au stress cellulaire et la neurotransmission. Des altérations de l’expression ou de la fonction de la FAAH ont été associées à une dérégulation des voies de neuroinflammation et de traitement de la douleur, et sont étudiées dans le contexte de phénotypes neuropsychiatriques et métaboliques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO FAAH (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène FAAH dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du FAAH, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert FAAH à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine FAAH.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en FAAH pour l'étude de la signalisation de FAAH, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de FAAH essentiels à la fonction de FAAH
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de FAAH pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le FAAH plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le FAAH plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus FAAH. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le FAAH plasmide HDR (h) et le FAAH (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie FAAH pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles FAAH définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.