Plasmide CRISPR/Cas9 KO C6 (m): sc-419396
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- C6 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique C6, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: C6 Antibody (3G11): sc-66191
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO C6 (m) | sc-419396 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **C6** code le composant du complément C6, une protéine de la voie terminale indispensable à l’assemblage du complexe d’attaque membranaire (MAC, C5b-9), qui forme des pores lytiques dans les membranes cibles. Après l’activation du complément par les voies classique, des lectines ou alternative, C6 se lie à C5b et initie le recrutement de C7, C8 et C9, reliant l’opsonisation et la signalisation inflammatoire à des dommages directs de la membrane. L’activité de C6 influence la surveillance immunitaire innée, les interactions hôte–pathogène et la régulation des microenvironnements inflammatoires. Une activité terminale du complément dérégulée a été associée à des lésions tissulaires inflammatoires et immuno-médiées, faisant de C6 une cible utile pour des études mécanistiques des pathologies liées au complément.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO C6 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène C6 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du C6, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert C6 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine C6.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en C6 pour l'étude de la signalisation de C6, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de C6 essentiels à la fonction de C6
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de C6 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le C6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le C6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus C6. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le C6 plasmide HDR (m) et le C6 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie C6 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles C6 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.