Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (h) C3: sc-400622-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) C3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C3 Double Nickase (h) et le plasmide C3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant C3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: C3 Antibody (B-9): sc-28294
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) C3 | sc-400622-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) C3 | sc-400622-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le composant 3 du complément (C3) est un nœud central de la cascade du complément humaine, reliant les voies classique, des lectines et alternative grâce à son activation protéolytique en C3a et C3b. Le dépôt de C3b favorise l’opsonisation et l’amplification via la formation de la C3 convertase, tandis que C3a agit comme une anaphylatoxine qui stimule le recrutement des leucocytes et la signalisation inflammatoire. Par ces activités, C3 coordonne la défense immunitaire innée, l’élimination des complexes immuns et l’interaction avec les réseaux de phagocytose et de cytokines. Une activité dérégulée de C3 est impliquée dans des pathologies inflammatoires et auto-immunes et est fortement associée aux lésions tissulaires médiées par le complément, notamment dans des mécanismes de maladie rénale et rétinienne.
C3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus C3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de C3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de C3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de C3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.