Les activateurs chimiques de Vmn2r65 déclenchent une série d'événements intracellulaires conduisant à son activation par diverses voies de signalisation. Le fluorure de sodium, par exemple, peut renforcer la phosphorylation des protéines effectrices en stimulant la production d'AMPc, un second messager qui active la protéine kinase A (PKA). La PKA phosphoryle alors Vmn2r65, ce qui entraîne son activation. De même, la forskoline stimule directement l'adénylyl cyclase, qui augmente les niveaux d'AMPc, activant ensuite la PKA qui phosphoryle et active Vmn2r65. L'histamine agit en se liant aux récepteurs couplés aux protéines G (RCPG) associés à Vmn2r65, déclenchant une cascade intracellulaire qui aboutit à l'activation de la phospholipase C (PLC). La PLC catalyse ensuite des réactions qui activent des kinases capables de phosphoryler Vmn2r65. L'isoprotérénol, en stimulant les récepteurs β-adrénergiques, augmente également les niveaux d'AMPc et active la PKA, qui à son tour phosphoryle et active Vmn2r65.
Outre ces voies médiées par l'AMPc, il existe d'autres mécanismes par lesquels les activateurs chimiques engagent Vmn2r65. Le chlorure d'aluminium et l'ionomycine augmentent les concentrations intracellulaires de calcium, ce qui peut activer la protéine kinase C (PKC) et d'autres protéines dépendantes du calcium pour phosphoryler Vmn2r65. La capsaïcine, en activant le récepteur TRPV1, provoque un afflux de calcium, qui active ensuite les kinases qui phosphorylent Vmn2r65. De même, l'acide kaïnique agit comme un agoniste des récepteurs du glutamate, entraînant une augmentation du calcium intracellulaire qui peut activer les kinases responsables de la phosphorylation de Vmn2r65. Le glutamate active également Vmn2r65 par l'intermédiaire de ses récepteurs, qui activent ensuite la PKC et d'autres kinases. L'acétylcholine, via les récepteurs muscariniques de l'acétylcholine, augmente l'IP3 et le calcium intracellulaires, conduisant à l'activation de kinases qui phosphorylent Vmn2r65. Enfin, l'adénosine interagit avec ses RCPG pour activer l'adénylyl cyclase ou PLC, augmentant ainsi les niveaux d'AMPc ou de calcium, qui activent alors les kinases qui phosphorylent et activent Vmn2r65. Chacune de ces substances chimiques, par le biais de différentes voies moléculaires, assure l'activation précise de Vmn2r65, ce qui démontre la capacité du récepteur à intégrer de multiples formes de signalisation cellulaire.
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