Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
WDR33 Plasmide Double Nickase (h): sc-409284-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- WDR33 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il WDR33 Double Nickase Plasmid (h) e il WDR33 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira WDR33. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: WDR33 Antibody (D-1): sc-374466
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
WDR33 Plasmide Double Nickase (h) | sc-409284-NIC | 20 µg | $410.00 |
WDR33 umano codifica una componente fondamentale del complesso CPSF (cleavage and polyadenylation specificity factor), che media la maturazione dell’estremità 3′ dei pre‑mRNA. WDR33 partecipa al riconoscimento del segnale canonico di poliadenilazione AAUAAA e contribuisce a coordinare il clivaggio endonucleolitico con l’aggiunta della coda poli(A), influenzando la stabilità dei trascritti, l’esportazione nucleare e la traduzione. Attraverso il suo ruolo nella poliadenilazione alternativa, WDR33 modula programmi globali di espressione genica e può incidere su proliferazione cellulare, differenziamento e risposte allo stress. La disregolazione della maturazione dell’estremità 3′ e dei componenti della via di poliadenilazione, incluso WDR33, è rilevante per studi sull’uso aberrante di isoforme di mRNA e sui cambiamenti di espressione genica osservati in diversi modelli di malattia.
WDR33 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus WDR33 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di WDR33. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di WDR33. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con WDR33 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.