PLC β3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401181

개요

PLCB3는 포스포리파아제 C 베타 3(PLC β3)를 암호화하며, PLC β3는 GPCR 및 일부 수용체 티로신 키나아제 신호의 하위에서 작동하는 막 결합형 효과기로서 PIP2를 가수분해하여 2차 전달자인 IP3와 DAG를 생성합니다. 이 반응은 세포 내 Ca2+ 동원과 단백질 키나아제 C(PKC) 활성화를 유도하며, 증식, 이동, 분비 및 면역세포 기능을 조절하는 신호전달 프로그램을 형성합니다. PLC β3 활성은 칼슘 신호, MAPK 연쇄반응, 세포골격 재구성과 통합되어, 세포외 자극을 전사 및 대사 반응과 연결합니다. PLCB3 관련 신호의 조절 이상은 종양성 및 염증성 맥락에서 관여하는 것으로 알려져 있어, 질환 관련 세포 모델에서 경로 연결 구조를 분석하는 데 유용한 핵심 지점으로 간주됩니다.

PLC β3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PLCB3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PLCB3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PLCB3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PLC β3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PLC β3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PLCB3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PLC β3 기능에 중요한 PLCB3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PLCB3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PLC β3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PLC β3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PLCB3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PLC β3 HDR 플라스미드 (h) 및 PLC β3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PLCB3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PLCB3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.