Partículas Lentivirales de Activación (h) Histone Deacetylase 11 (HDAC11): sc-402103-LAC

HDAC11 codifica la histona desacetilasa 11, la única histona desacetilasa de clase IV, que regula la accesibilidad de la cromatina y los programas transcripcionales mediante la des-acilación de lisinas, incluidas actividades de desacetilación y de eliminación de acilos grasos. Al moldear los estados epigenéticos, HDAC11 influye en la diferenciación de las células inmunitarias y en la señalización inflamatoria, afectando vías que controlan la expresión de citocinas, la presentación de antígenos y la adaptación metabólica. La expresión o actividad alteradas de HDAC11 se han asociado con respuestas inmunitarias desreguladas y estados transcripcionales oncogénicos, lo que respalda su investigación en inmunología, biología hematológica y epigenética tumoral. Estas funciones hacen de HDAC11 un nodo útil para explorar cómo las enzimas epigenéticas coordinan redes de expresión génica que gobiernan la proliferación, la diferenciación y las respuestas al estrés.

Las partículas de activación lentiviral Histone Deacetylase 11 (HDAC11) (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de HDAC11 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Histone Deacetylase 11 (HDAC11) (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción HDAC11, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Histone Deacetylase 11 (HDAC11). El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo HDAC11 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.