Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) BMAL1: sc-419206-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)BMAL1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa BMAL1 (m) y el plásmido de doble nickasa BMAL1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Arntl. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BMAL1 Anticuerpo (B-1): sc-365645
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) BMAL1 | sc-419206-NIC | 20 µg | $410.00 |
Arntl codifica el factor de transcripción circadiano central BMAL1, que forma un heterodímero con CLOCK para unirse a elementos E-box e impulsar la expresión rítmica de genes controlados por el reloj. Esta red de retroalimentación de transcripción–traducción coordina las oscilaciones celulares del metabolismo, la homeostasis redox, las respuestas al daño del ADN y la señalización inmunitaria en distintos tejidos. La actividad de BMAL1 se integra con vías que incluyen la represión por PER/CRY, los bucles de receptores nucleares REV-ERB/ROR y programas de detección de nutrientes que ajustan la función mitocondrial y el uso de lípidos y glucosa. La señalización ARNTL/BMAL1 desregulada se ha asociado con fenotipos de sueño-vigilia y conducta en sistemas modelo, y se estudia con frecuencia en el contexto de procesos metabólicos, inflamatorios, neurodegenerativos y relacionados con el cáncer, en los que el control circadiano modula programas de expresión génica relevantes para la enfermedad.
BMAL1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Arntl en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Arntl. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Arntl. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Arntl alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.